近年來隨著生物技術的發(fā)展，動物細胞培養(yǎng)技術已從簡單的試驗研究拓展到了生物學研究和商業(yè)應用領域。生物制品如生物基因工程疫苗、病毒性疫苗、醫(yī)學治療性抗體的研究與生產都用到了細胞培養(yǎng)技術。應用較廣泛較安全的動物細胞基質是Vero細胞。Vero細胞是世界衛(wèi)生組織(WHO)和《中國藥典》認可的疫苗生產細胞系。

Vero細胞(非洲綠猴腎細胞)是日本學者Yasumura和Kawakita兩人在1962年正式從非洲綠猴腎臟分離的，初次用于生產人用生物制品的異倍體貼附依賴性細胞，并建立了細胞系和不同代次的細胞庫。在此之前，對生物制品的研究和生產只允許用原代細胞或二倍體細胞。

二倍體細胞系傳代次數有限，當傳代達到一定代次后就會衰老凋亡，致使生產工藝無法投入到規(guī)?；a。長久以來，人們對將傳代細胞作為生物制品生產基質的考慮和應用很少，因檢測手段有限，對其致瘤性和外源性污染等特性研究不清楚，直到1987年，WHO才正式批準傳代細胞系作為生物制品生產的基質。

Vero細胞被批準用于人用疫苗的生產后，開始生產的人用疫苗是Barrett等[1]生產的脊髓灰質炎滅活疫苗(IPV)，之后Vero細胞用于狂犬病毒疫苗和口服脊髓灰質炎病毒疫苗(OPV)等多種人用疫苗生產。Vero細胞在病毒性疫苗生產的應用已有30年之久，尤其是狂犬病毒疫苗和脊髓灰質炎疫苗。

Vero細胞系廣泛應用于人用疫苗的生產是基于其*的特性。Vero細胞因其固有的基因缺陷，不能表達抗病毒蛋白干擾素。Barrett等[1]試圖用新城疫病毒、仙臺病毒、風疹病毒感染Vero細胞生產干擾素，結果表明Vero細胞不能表達分泌干擾素蛋白。然而，在相同條件下，改用BSC-1細胞和其他靈長類動物細胞重復這一實驗時，這些細胞系可以表達分泌大量干擾素蛋白。有文獻報道，Vero細胞可能存在β和α基因的缺陷，不能表達干擾素蛋白[2]。Vero細胞的廣泛易感特性促進了使用Vero細胞生產疫苗事業(yè)的發(fā)展。

除了以上優(yōu)勢，與生產生物制品生產用原代細胞系和二倍體細胞系相比，Vero細胞還具有以下優(yōu)勢：

一、來源方便，容易建立細胞庫和保存，可連續(xù)傳代，生長速度快；

二、Vero細胞遺傳性狀穩(wěn)定，惡性化概率小，無外源性污染，具有良好的生物安全特性；

三、Vero細胞對多種病毒敏感，生產的病毒滴度高；

四、Vero細胞對培養(yǎng)條件要求不高，在微載體表面能良好的貼附生長，易在生物反應器放大培養(yǎng)。

培養(yǎng)基的質量直接關系到疫苗的品質。目前用于Vero細胞的培養(yǎng)基主要有M199、MEM、DMEM等合成培養(yǎng)基。近有報道，HiMedia公司生產的SFRE 199培養(yǎng)基（SFRE 199是在基礎培養(yǎng)基M199的基礎上改良的）也可用于Vero細胞的無血清培養(yǎng)[3]。如下圖所示，分別用添加水解乳蛋白的F-12和SFRE 199-1培養(yǎng)Vero細胞，結果顯示Vero細胞在無血清的SFRE199-1中生長狀態(tài)良好。

參考文獻

［1］ Barrett PN，Mundt W，Kistner O，et al． Vero cell platform in vaccine production: moving towards cell culture-based virul vaccines［J］． Expert Ｒev Vaccines，2009，8(5) ，607-618．

［2］ 吳雪伶，袁寶珠． 干擾素系統(tǒng)的完整性與 Vero 細胞病毒敏感性的相關性［C］/ /2012 年中國藥學大會暨第十二屆中國藥師周論文集． 北京: 中國藥學會，2012．

［3］ Jack Litwin.The growth of Vero cells in suspension as cell-aggregates in serum-free media. State Bacteriology Laboratory, 105 21 Stockholm, Sweden.

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商，在細胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)及檢測領域，一如既往地為您帶來的服務。